春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

被引：6

作者：

单丽丽

陆瑞菊

王亦菲

陆惠丽

黄剑华

机构：

[1] 上海市农业科学院生物技术研究所

来源：

中国农学通报 | 2008年 / 01期

关键词：

春兰; RAPD; DNA; 反应体系;

D O I：

暂无

中图分类号：

S682.31 [兰科植物];

学科分类号：

摘要：

以春兰为研究材料,对春兰基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化。结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量春兰基因组DNA。电泳检测表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要。同时对春兰RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合春兰RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μl反应体系中含1UTaqDNA聚合酶,60μmol/LdNTPs,2.25mmol/LMg2+,1.0μmol/L引物,1.5ng/μl模板DNA。

引用

页码：68 / 73

页数：6

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