选题依据：抑郁症是常见的精神障碍,以显著而持久的心境低落为主要临床特征,其终生患病率高达15-20%,抑郁症的发病率多年来一直居高不下,已越来越引起医药卫生界的重视。近年来,治疗抑郁症的新药层出不穷,但是由于其发病机制复杂,抗抑郁药临床疗效滞后,且不良反应明显,因此,阐明抑郁症的发病机制及抗抑郁药物的药理学作用机制,并研发理想的抗抑郁新药成为了研究热点。本课题组前期在抗抑郁名方逍遥散的基础上,对其进行最佳抗抑郁组分的药效学筛选,明确了其药效物质基础为其中的低级性组分,并且去掉了对抗抑郁组分几乎无贡献的白芍和茯苓两味中药,得到复方柴归方(由柴胡、当归、白术、生姜、薄荷、炙甘草组成),并经过工艺筛选,确定超临界C02萃取为最佳工艺,得到复方柴归方临界C02萃取有效组分(FFCGF)。基于课题组前期的研究结果,本课题拟对FFCGF的抗抑郁作用机制进行探讨。目的：从血清1H NMR代谢组学、cAMP-PKA-CREB-BDNF信号转导通路和炎性细胞因子等方面探索FFCGF的抗抑郁机制,发现相关的代谢途径、寻找可能的作用靶点或靶标。方法：采用CUMS大鼠抑郁模型,采用血清1H NMR代谢组学的方法,同时通过ELISA、Real Time-qRT-PCR的手段对大鼠海马组织中的cAMP信号转导通路相关因子及其mRNA和血清中的炎性细胞因子进行检测,对FFCGF的抗抑郁作用机制进行分析。结果：1.血清1H NMR代谢组学研究结果表明,在主成分分析(PCA)散点图中,CUMS大鼠的轨迹与空白对照组完全分开,表明模型复制成功,经FFCGF干预后,给药组的轨迹图均有向空白对照组恢复的趋势。PCA的载荷图结合1HNMR半定量分析的结果显示,CUMS大鼠血清中异亮氨酸、胆碱、氧化三甲胺的水平比空白对照组降低,而乳酸、苏氨酸、p-葡萄糖的水平升高(P<0.05或P<0.01),FFCGF干预后,这些代谢物的水平均显著回调,同CUMS模型组对比有显著差异(P<0.05或P<0.01)。2.与空白对照组相比,CUMS大鼠海马组织中的cAMP、PKA、p-CREB、 BDNF的水平显著降低(P<0.01),FFCGF干预后,均有所提高(P<0.05或P<0.01)；同时,Real Time-qRT-PCR的结果显示CUMS海马组织中的PKA.BDNF、 TrkB和CREB的mRNA水平同空白对照组相比均有降低,而FFCGF可使其恢复,提示FFCGF可能通过干预cAMP信号转导通路发挥抗抑郁作用。3.与空白对照组相比,CUMS大鼠血清中的炎性细胞因子(如IL-1、IL-6、 PGE2、COX-2)的水平显著增加(P<0.01),FFCGF干预后,均有所降低(P<0.05或P<0.01),提示FFCGF可能通过调节炎性细胞因子发挥抗抑郁作用。结论：1.FFCGF可通过调节大鼠内源性代谢产物的变化而发挥抗抑郁作用,其抗抑郁作用机制可能同对能量代谢、氨基酸代谢、肠道微生物代谢的调节作用有关。2. FFCGF的抗抑郁作用可能同其对cAMP-PKA-CREB-BDNF信号转导通路因子如cAMP含量、PKA活性、CREB的磷酸化水平和BDNF的水平的调节有关,以及对相关蛋白如PKA、CREB、BDNF和TrkB的mRNA的影响有关。3. FFCGF可能通过调节炎性细胞因子如IL-1、IL-6、PGE2、COX-2的水平,恢复机体免疫系统发挥抗抑郁作用。
