半夏多糖的结构与抗肿瘤活性研究

半夏多糖是半夏药材中的重要组成部分，研究发现，半夏多糖具有抗肿瘤作用，它具有网状内皮系统激活活性，可抑制肿瘤的发生和增殖。为了探讨半夏多糖的抗肿瘤作用机制，本文研究了半夏多糖的结构、体内外清除自由基的能力以及抗肿瘤活性。主要采用超声醇沉法提取半夏多糖，用气相色谱、红外光谱研究半夏多糖的结构，并采用四种不同的抗氧化评价系统以及荷瘤小鼠模型分别研究了半夏多糖的抗氧化与抗肿瘤作用，实验结果表明，半夏多糖的抗肿瘤作用可能与半夏多糖具有β-D-葡聚糖的结构有关，半夏多糖可能是通过对体内自由基的清除达到抗肿瘤作用。 本文主要研究成果可归纳为以下几个方面： （1）以半夏药材为原料，采用超声醇沉法从半夏药材中提取半夏粗多糖PT-0，其提取率为1.538％。经季铵盐沉淀法分离PT-0得到三种多糖亚成分PT-1、PT-2、PT-3，得率分别为25.8％，16.7％，22.75％。通过苯酚-硫酸法检测四种多糖总糖含量，分别为83.37g／100g、95.04g／100g、97.63g／100g、90.26g／100g。PT-2为白色针晶状形貌，其余各种多糖均为白色粉末状物质，四种多糖均溶于水，不溶于有机溶剂。紫外分光光度计检测结果显示，这几种多糖均不含核酸和蛋白质等杂质成分。对PT-0衍生化后，其溶解度增大。红外吸收光谱显示，所有多糖均为吡喃型β-D葡聚糖，具有β-多晶形构型。气相色谱研究结果表明：PT-0主要由木糖、甘露糖、果糖、半乳糖、葡萄糖组成；PT-1由木糖、甘露糖、葡萄糖组成；PT-2由木糖、果糖、半乳糖、葡萄糖组成；PT-3由鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成；C-PT-0由D-甘露糖、D-果糖、D-山梨糖、D-葡萄糖组成：S-PT-0由D-甘露糖、D-果糖、D-半乳糖、D-山梨糖、D-葡萄糖构成。 （2）用K3[Fe（CN）6]与TCA体系测定半夏多糖的还原能力，用卵黄脂蛋白不饱和脂肪酸（PUFA）过氧体系测定半夏多糖的脂质过氧化能力，用邻二氮菲体系以及碱性邻苯三酚体系分别测定半夏多糖清除·OH及O2-自由基的能力。结果显示，半夏多糖在体外具有抗氧化活性，具有较强的还原能力，可抑制O2-及·OH自由基产生，其中PT-2的抗氧化能力与多糖浓度呈很好的量效关系。 （3）采用荷瘤小鼠模型研究PT-0和PT-2的抗肿瘤活性，实验结果表明，两种多糖均能提高机体的免疫功能，PT-0能显著抑制小鼠的实体瘤的生长，其有效抑瘤率比PT-2高，抑瘤效果优于PT-2。对小鼠肝、心、脑和血清中的SOD、GSH-PX、CAT及丙二醛含量的研究发现，PT-2可特异影响小鼠组织中SOD酶活力，具有靶向效应：PT-0对肝脏、心肌中GSH-PX酶活力的提高可能与多种多糖的协同效应有关，而脑和血清中GSH-PX酶活力的提高可能是除PT-2以外其它多糖成分在起主要作用。同时，PT-2对小鼠心组织中过氧化氢酶活力影响显著。当PT-0和PT-2达到一定浓度时，可降低小鼠肝组织和心肌组织中的丙二醛含量，但PT-0的有效浓度低于PT-2，多糖的多成分共同作用可能是其中的主要原因。PT-2能够显著降低小鼠脑组织中丙二醛含量，亦能特异降低小鼠血清中丙二醛含量。研究发现，半夏多糖的抗肿瘤作用可能与他们的结构密切相关。