松仁多糖的理化性质及免疫功能研究

红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc)，是主产于中国小兴安岭的珍贵树种。其种仁具有软化血管、降低血脂、胆固醇、甘油三脂及防止衰老的功能，具有广阔的应用开发潜力。 本文以红松松仁为原料，利用现代分离分析手段，对松仁多糖的提取工艺、纯化分级、理化性质、结构特征以及免疫活性进行了研究，主要结果如下： 1、分别采用水提法、超声波和微波辅助提取法提取多糖，并对这三种提取方法的最佳工艺进行了优化研究，多糖得率分别为6.26％，10.74％和6.01％。超声波和微波辅助提取均明显缩短了提取时间，具有高效、节能的优点。 2、松仁多糖粗品(PNPC)除去蛋白质和小分子杂质，得到多糖精品(PNPP)，经DEAE-52离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析分离纯化，得到了四个主要级分，分别为PNP1-a，PNP1-b，PNP2-a和PNP3-a，经纸色谱和高效液相色谱鉴定均为均一组分。 3、松仁多糖四个级分的分子量分别为1.02×10～5Dal，1.43×10～4Dal，1.10×10～5Dal和1.63×10～5Dal。PNP1-a由鼠李糖和葡萄糖组成，摩尔比为1.00∶2.57；PNP1-b由阿拉伯糖和葡萄糖组成，摩尔比为1.00∶4.03；PNP2-a和PNP3-a均由葡萄糖一种单糖组成。经红外光谱(FTIR)、紫外光谱和核磁共振光谱(NMR)对各组分进行结构分析，确定PNP1-a、PNP1-b、PNP2-a和PNP3-a的组成单糖均为β-吡喃糖。 4、松仁多糖各剂量组均能显著增加小鼠免疫器官的重量，对小鼠的细胞免疫功能和单核-巨噬细胞吞噬功能也均有促进作用，其中，中剂量组250mg／kg·d均达到了显著差异水平。此外，松仁多糖各剂量均能促进小鼠两种细胞因子IL-2和IL-6的分泌，这表明多糖可以增强机体的特异性体液免疫应答。