溃疡性结肠炎患者β-内啡肽的表达与免疫功能变化的相关性研究

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）是一种累及直肠和结肠黏膜及黏膜下层的非特异性慢性炎症，临床上主要表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重。其病程迁延不愈，活动期与缓解期交替出现，并有癌变可能。近年来发病呈上升趋势，其病因及发病机制尚未完全阐明，目前认为是环境因素、遗传易感性、肠道菌群失调、免疫功能紊乱、氧自由基损伤、精神心理等因素共同作用所致。越来越多的学者认为UC是一种自身免疫性疾病，免疫功能亢进、免疫调节异常与UC发病关系密切，其中免疫调节是UC研究最活跃的领域，而T细胞亚群功能紊乱及促炎性细胞因子和抗炎性细胞因子之间的失衡在免疫调节异常中充当重要角色，并与UC活动密切相关。 β-内啡肽（β-endorphin, β-EP）是体内自己产生的一类内源性阿片肽类物质，在垂体及外周免疫细胞合成分泌，存在于垂体、丘脑下部、胃肠道、血浆中。β-EP的合成和释放受下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节，它通过与以μ、κ、δ为主体的中枢及外周阿片受体作用发挥广泛的生理作用。β-EP通过与免疫细胞表面的阿片受体及非阿片受体结合，调节机体免疫细胞及细胞因子的活性来介导免疫调节作用。β-EP在免疫调节中发挥着重要的作用，是机体维持免疫平衡的重要因子。关于β-EP在UC免疫调节中的研究目前国内外鲜有报道。 目的：观察UC患者血浆中的β-EP与T细胞亚群、促炎细胞因子白介素-1β （Interleukin1β, IL-1β）在活动期及缓解期的变化及其相关性，并测定结肠黏膜组织病理学及组织中β-EP及IL-1β水平，探讨β-EP对其中的免疫机制的调节作用，从而为UC的临床治疗提供新的靶点与方向。 方法：收集30例UC患者活动期的外周静脉血及结肠黏膜活检组织作为病例组（UCa），并收集该组患者缓解期的外周静脉血（UCr）。收集15例大肠息肉患者，取其外周静脉血及正常结肠黏膜组织。按照SoutherlandDAI评分标准对UC患者进行评分，将其分为轻度、中度及重度活动组。年龄及性别在各组间的差异无统计学意义（P＞0.05）。采用放射免疫法对血浆中β-EP及血清中的IL-1β表达水平进行检测；采用流式细胞术对血浆中的T细胞亚群（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）表达水平进行检测；采用免疫组织化学染色对结肠组织中的β-EP、IL-1β表达进行检测。根据检测结果，了解UC患者活动期及缓解期血液中各指标与对照组的差别是否有显著性差异；了解UC患者活动期组织中各指标与对照组的差别是否有显著性差异；对UC患者活动期及缓解期血浆中β-EP的变化与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IL-1β的变化进行统计学分析，了解它们的变化是否有相关性。 结果： 1血液中各指标检测结果 1.1病例组血浆β-EP的表达水平明显高于对照组（P<0.05）；且病例组不同病情严重程度间β-EP的表达水平均有差异，依次为：轻度活动组<中度活动组<重度活动组，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。 1.2病例组血清IL-1β的表达水平明显高于对照组（P<0.05）；且病例组不同病情严重程度间IL-1β的表达水平均有差异，依次为：轻度活动组<中度活动组<重度活动组，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。 1.3病例组血浆中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的表达水平明显高于对照组（P<0.05）；且病例组不同病情严重程度间CD4+、CD4+/CD8+的表达水平均有差异，依次为：轻度活动组<中度活动组<重度活动组，各组间的差异具有统计学意义（P<0.05）。 2结肠组织中各指标检查结果 2.1结肠组织中β-EP在病例组的表达明显高于对照组（P<0.05）；不同严重程度间β-EP的表达水平均有差异，依次为：轻度活动组<中度活动组<重度活动组，各组间的差异有统计学意义（P<0.05）。 2.2结肠组织中IL-1β在病例组的表达明显高于对照组（P<0.05）；不同严重程度间IL-1β的表达水平均有差异，依次为：轻度活动组<中度活动组<重度活动组，各组间的差异有统计学意义（P<0.05）。 3相关性分析 3.1血浆中β-EP在活动期与缓解期的变化与CD4+的变化成正相关，相关系数为0.532（P<0.05）。 3.2血浆中β-EP在活动期与缓解期的变化与CD4+/CD8+的变化成正相关，相关系数为0.964（P<0.05）。 3.3血浆中β-EP在活动期与缓解期的变化与IL-1β的变化成正相关，相关系数为0.522（P<0.05）。 结论： 1UC活动期血浆及结肠组织中的β-EP的表达较对照组明显升高；且其表达随着病情的加重而升高，在一定程度上可以反映疾病的严重程度。 2IL-1β、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+在病例组的表达较对照组明显升高，验证了UC患者存在免疫调节紊乱、免疫亢进。 3UC患者血浆中β-EP在活动期与缓解期的变化与CD4+、CD4+/CD8+、IL-1β的变化成正相关，说明β-EP可能通过调节T细胞亚群及IL-1β的分泌参与UC免疫机制的调节。 4监测β-EP的表达水平对UC患者病情严重程度的评估具有重要意义；β-EP参与了UC患者免疫机制的调节，通过对其作用机制的研究，为β-EP在UC患者中的治疗提供了理论依据,为临床治疗UC带来了新的契机。