八种蜂花粉多糖的分析及抗肿瘤活性研究

蜂花粉具有多种生物活性，广泛地应用于保健食品和药品。多糖是蜂花粉的活性成分之一，具有提高免疫功能、降血糖、抑菌和抗氧化等作用，应用前景广阔。为了全面探索蜂花粉多糖的组成及结构特征与活性的关系，本论文选用虞美人（Papaver rhoeas）、玫瑰（Rosa rugosa）、野菊花（Dendranthema indicum）、荞麦（Fagopyrum esculentum）、山茶（Camellia japonica）、五味子（Schisandra chinensis）、油菜（Brassica campestris）和荷花（Nelumbo nucifera）蜂花粉为研究对象，通过水提醇沉得到水溶性总多糖，再通过离子交换层析法系统地对八种蜂花粉总多糖进行分级，进而比较了各级分的组成和结构特征的异同及其与抗肿瘤活性的关系。 八种蜂花粉总多糖的产率为4%-11%，具有不同的单糖组成和结构特征。通过DEAE-纤维素离子交换层析，优化出适合总多糖分级纯化的条件，将其分级为一个中性糖和两个酸性糖级分，分别分析各级分的糖含量、糖醛酸含量、单糖组成、分子量和结构特征，比较各级分的异同。结果表明蜂花粉中性糖级分主要由葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、阿拉伯糖（Ara）和甘露糖（Man）组成，其中Ara:Gal约为1:1，而Glc含量差异较大，主要由阿拉伯半乳聚糖和葡聚糖结构域组成，分子量在1.010～4Da左右。0.2M、0.4MNaCl洗脱的酸性糖级分主要由鼠李糖（Rha）、半乳糖醛酸（GalA）、Gal和Ara组成，含有I型聚鼠李半乳糖醛酸（RG-I）、聚半乳糖醛酸（HG）结构域及阿拉伯半乳聚糖结构域，Gal和Ara含量有明显差异。0.4M NaCl洗脱的酸性糖级分分子量分布范围较广，含有比例相近的RG-I和AG结构域，其中RG-I结构域的比例要高于同种蜂花粉多糖0.2M NaCl洗脱级分。 蜂花粉总多糖具有较好的体外抑制人结肠癌细胞系HCT116和HT29细胞的活性，呈现浓度依赖性。中性糖级分体外抗肿瘤活性较酸性糖级分好，可能与其含有阿拉伯半乳聚糖和葡聚糖结构域、分子量小、溶解性好等因素有关。酸性糖级分的体外抗肿瘤活性较中性糖级分弱，可能与其分子量大、溶解度较差有关。中性糖是蜂花粉多糖发挥抑制肿瘤细胞增殖活性的主要活性级分。 本论文通过比较研究不同来源的蜂花粉多糖的组成及结构特征和抗肿瘤活性，为研究蜂花粉多糖的结构及构效关系奠定了基础。