椪柑为我省湘西主要果树产业之一,但由于其加工滞后,果品附加值低,为促进椪柑果实的加工利用及其产业的持续高效发展,本论文以湖南农业科学院园艺研究所采集的椪柑果实为材料,对椪柑果实活性成分的含量与变化,以及主要活性成分的提取、纯化技术进行了系统研究。主要研究结果如下:
1、采用高效液相色谱法测定椪柑果实活性成分的含量,发现椪柑果实活性成分主要为黄酮类的橙皮苷和生物碱类的辛弗林,不含柚皮苷和新橙皮苷,椪柑果实可以作为提取高纯度橙皮苷的原料;果实中活性成分主要分布在果皮和果肉中,种子不含此类活性成分;椪柑果实橙皮苷含量远远高于辛弗林的含量;同样大小椪柑果实橙皮苷和辛弗林含量明显高于商品枳实和枳壳。由此可见,椪柑果实同样可以作为中药材及其活性成分的提取原料。
此外,随着果实发育时期的推移,果实直径的增大和重量的增加,橙皮苷和辛弗林的含量逐渐下降,其活性成分含量与果实大小呈回归相关性,回归方程分别为:y1=0.046x1-0.442x2+1.844,y2=0.227x1-2.235x2+15.161,其中y1为辛弗林的含量(%),y2为橙皮苷的含量(%),x1为平均果重(g),x2为果实大小(cm)。
2、通过单因素和正交试验,确定回流提取辛弗林最佳工艺条件条件为:提取温度80℃,乙醇浓度95%,料液比8:1,提取时间2h。所取得的最佳提取工艺进行5次平行试验,获得辛弗林平均产率为0.99%,总黄酮平均产率为7.42%。提取物中辛弗林的含量为4.6%,总黄酮含量为49.1%。
3、以椪柑提取液为上样原料,确定了阳离子交换树脂纯化辛弗林工艺条件为:以001×7阳离子交换树脂作为吸附材料,pH值为4,上样流速为5mL/min,以3%氨水洗脱,洗脱流速为3mL/min,采集氨水洗脱流出液。流出液经旋转蒸发,真空干燥后,辛弗林纯度为90.1%,达到理想的纯化辛弗林效果。