芦笋（Asparagus officinalis Linne）学名石刁柏,又名龙须菜,属百合科（Liliaceae）植物,含有丰富的类黄酮化合物芦丁（Rutin）。类黄酮是药用植物中的主要活性物质之一,具有抗炎症、免疫调节活性、抗肿瘤、调节血脂、抗氧化、自由基清除、抗病毒等多种生物活性。近年来,关于芦笋的开发和利用受到人们的广泛关注。
本研究采用超声波法和索式抽提法提取芦笋总黄酮,按照60%、70%、80%、90%四个乙醇溶液梯度提取。单波长法测定,检测波长510nm。实验结果表明,超声波法提取总黄酮的稳定性的相对标准偏差（RSD）在3.75%6.15%之间,而索氏提取法提取总黄酮的稳定性的RSD在1.08%3.44%之间;超声波法提取总黄酮的重复性的RSD在1.34%3.26%之间,索氏提取法提取总黄酮的重复性的RSD在2.19%4.95%之间;在回收率方面,两种方法提取的黄酮回收率均在97.90%106.6%范围内。从稳定性、重复性、回收率来看,这两种提取方法结果准确可靠,均可用于后续试验。而从黄酮提取的得率来看,80%乙醇浓度索氏提取法所得黄酮的得率最高,达到了5.305mg/g的得率,即每克芦笋干粉可得黄酮类物质5.305mg黄酮。因此,确定本实验提取黄酮采用索氏提取法,提取溶剂为80%乙醇溶液,提取时间为回流提取6h。
通过研究黄酮对LPS刺激体外培养的巨噬细胞RAW264.7产生NO的量,进一步证实黄酮清除自由基、抗氧化的效果。LPS与黄酮同时加入共培养72h,只有黄酮400μg/ml、800μg/ml两组效果明显;LPS刺激48h后再加入黄酮,过24h后取上清测NO,6个黄酮刺激组200μg/ml黄酮时效果最明显,而且均强于LPS与黄酮同时加入的组。推断在对LPS刺激巨噬细胞产生NO的影响效果上,芦笋黄酮提取物清除培养液中NO自由基的效果要明显强于其对iNOS免受激活的保护上。
以D-半乳糖衰老小鼠为研究对象,观察芦笋黄酮对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆功能的影响,对其脑组织中脂褐素、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、单胺氧化酶（MAO）、乙酰胆碱酯酶（TchE）的影响。以4周龄雄性昆明种小鼠,给以400mg/kg腹腔注射,每天一次,持续8周。同时给于低剂量50mg/kg、中剂量100mg/kg、高剂量500mg/kg黄酮溶液饮用,与建立模型一样,共饮用8周。实验指标检测结果显示,8周后模型组小鼠毛色灰暗稀疏,行动迟缓,在新环境中理毛次数和站立次数要明显少于治疗组。记忆能力检测显示,Y水迷宫避暗实验结果显示,中剂量和高剂量与模型组比较,记忆功能改善效果明显;Morris水迷宫实验结果显示,中剂量和高剂量与模型组比较,记忆功能改善效果明显。SOD、MDA、MAO、TchE四个组织学指标结果显示,芦笋黄酮对D-半乳糖衰老小鼠生理生化水平的改善效果明显,中剂量和高剂量效果好于小剂量治疗组,但是没有明显的剂量依赖关系。
