茶籽饼中茶皂素的提取纯化研究

我国茶籽资源十分丰富，对茶皂素进行开发、应用前景广阔，经济效益明显。本文在综述了茶籽饼中茶皂素（Tea Saponin）的性质及在各领域的应用和茶籽饼中茶皂素的检测、提取和纯化的基础上，以纯化的茶皂素为标准品，采用紫外分光光度法和反相高效液相色谱法（HPLC）对茶籽饼中茶皂素进行检测，优化从茶籽饼中依次提取茶油和茶皂素的工艺条件，采用除色素和大孔吸附树脂法对粗茶皂素进行纯化。 本论文的研究工作由以下几个部分组成： （1）茶皂素的定量分析 研究了用索氏提取器提取茶籽饼中茶皂素，反相高效液相色谱法（HPLC）测定茶皂素含量的方法；以RP-ODS（150mm×4.6mm，i．d．，5μm）作分析柱，以甲醇作流动相，流速控制在0.50 ml／min，检测波长280nm，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得到工作曲线为Y=3.54×10～6X+1.15×10～5，相关系数达0.9997。方法标准回收率97.93％～102.78％，相对标准偏差为0.10％～0.49％之间。通过反相高效液相色谱法测定茶籽饼中茶皂素的含量为12.706％。该法快速简捷，精密度高，重现性好，适于茶籽饼中茶皂素的检测。 （2）茶油和茶皂素的提取 用索氏提取法对茶籽饼中茶油和粗茶皂素的提取进行了研究，选择石油醚（沸程60-90℃）和甲醇分别作为茶油和茶皂素的最佳提取剂，通过一系列单因素实验和L9（3～3）正交实验，得出提取茶油的最佳工艺条件是：时间120min，料液比6mL／g，回流速度4min／次，提取率为7.8％；提取粗茶皂素的最佳工艺条件为：时间120min，料液比6mL／g，回流速度12min／次，提取率为18.77％。该法提取与分离工艺简单，提取率高，适应于工业化生产。 （3）茶皂素的纯化 研究比较几种脱色剂对茶皂素脱色效果的影响，结果表明双氧水用于茶皂素的脱色效果较好，通过正交实验得出其最佳脱色条件为：脱色温度60℃、脱色时间90min、H2O2加入量为3％，溶液pH值为10。 以经过处理了的茶籽饼甲醇提取物为原料，考察了AB-8、S-8、X-5、D-4020、NAK-9大孔吸附树脂对茶皂素的吸附效果和解吸情况，确定了AB-8树脂对茶皂素的吸附和洗脱效果较理想。结果表明：pH=5、流速1BV／h，以90％的甲醇作洗脱剂，树脂使用4次后可再生使用。利用AB-8大孔吸附树脂分离、丙酮沉淀、甲醇结晶的方法可将茶籽饼甲醇提取物中的茶皂素提纯到96％以上，得率大于60％。