花椒挥发油的提取分离及其抗菌和抗肿瘤作用研究

花椒（Zanthoxylum Bungeanum Maxim）系芸香科（Rutaceae）花椒属（Zanthoxylum Linn）植物，在我国广泛分布。花椒果实是传统的调味品，也是常用中药，可用于治疗呕吐、腹泻、蛔虫病等，外用可治疗湿疹瘙痒、活血散瘀，而且对心血管系统疾病的治疗及镇痛、镇静、抗炎、抑菌等方面均有明显的药理活性。花椒挥发油是其最重要的有效活性成分之一，本研究以陕西“大红袍”花椒品种为材料，对采用超临界CO2萃取和乙醇回流萃取两种方法提取挥发油有效成分进行了比较，并分离纯化得到9个样品，且进一步研究了9个样品在抗菌和抗肿瘤方面的药效作用。 超临界CO2萃取研究结果表明：在本试验条件下，温度（T）、压力（P）、萃取时间（t）三个影响因素主次关系为：T＞P＞t；样品粒度为4目，质量为200g时，最佳萃取条件为：压力33 Mpa，温度55℃，时间1.0 h，花椒挥发油萃取率为10.2％。气质联用（GC-MS）法分析结果表明，花椒挥发油由3-甲基-2-氮杂芴、Y-萜品烯、3-蒈烯等31个化学成分组成，其中3-甲基-2-氮杂芴含量最高，达到18.63％。 在花椒挥发油抗菌实验中，通过滤纸片法和试管法研究了9个样品对8种受试菌的作用，结果表明：细菌中，9号样品对大肠杆菌抑制作用最明显，MIC为1.25％；8号样品对枯草杆菌抑制作用最明显，MIC为0.625％；所有样品对金黄色葡萄球菌均无抑制作用。真菌中，6号样品对黑曲霉和米曲霉3042的抑制孢子生成作用最明显，MIC均为1.25％；1、9号样品对叶点霉抑制作用最明显，MIC均为1.25％；1号样品对刺盘孢霉抑制作用最明显，MIC均为1.25％；6号样品对酵母菌有抑制作用，MIC为5％。实验中首次发现，6号样品对真菌的孢子生成有抑制作用，但对其作用机理有待进一步探讨。花椒挥发油有明显的抑菌作用：超临界CO2萃取法提取的挥发油对真菌的抑制作用要明显强于用传统的乙醇回流萃取法；而传统的乙醇回流萃取法得到的挥发油对细菌的抑制作用明显强于超临界CO2萃取法。 在花椒挥发油抗肿瘤作用的初步研究中，通过观察细胞形态、活细胞的数量（MTT法测定细胞中酶活性）和细胞生长速度（生长曲线法）三个指标检测结果表明：9号样品在浓度为1.5mg／ml时对黑色素瘤细胞A375有明显的抑制和杀伤作用，而对正常成纤维细胞CCD-39抑制作用不明显，但因所做指标只有三个，还有待进一步验证。