目的:本研究在裸鼠背部皮下植入不同根尖孔大小的牙根段以及不同的管状载体--牙根段和皮质骨段,探讨不同根尖孔大小对牙髓再生组织量的影响,以及牙本质与皮质骨提供的不同矿化微环境对牙髓再生的影响,以期为牙髓再生的应用提供实验依据。方法:1.实验一:收集2015年7～9月在广西医科大学附属口腔医院就诊且因正畸治疗需要拔除的健康前磨牙,截取牙齿根尖1/3制备成约6mm长的牙根段,随机平均分成5组(N=60)并预备成不同的根尖孔直径,即0.3mm组、0.5mm组、0.7mm组、0.9mm组、1.1mm组,牙根段内植入复合血管内皮生长因子(VEGF)的多肽水凝胶胶原支架,冠方用MTA严密封闭。选取6周龄雄性裸鼠30只,于裸鼠背部皮下左右两侧各植入1个牙根段,植入8周后取出样本进行组织学评价。2.实验二:收集2015年10～12月在广西医科大学附属口腔医院就诊且因正畸治疗需要拔除的健康前磨牙,截取牙齿根中1/3,同时截取SD大鼠股骨(直径约1.2mm),制备成约6mm长的牙根段(R组,N=32)和皮质骨段(B组,N=32)。在相同的条件下预备牙根段与皮质骨段管腔内壁,形成不同的管腔内壁微环境。随机将32个牙根段和皮质骨段各分成4个亚组,其中VEGF、blood、hydrogel组分别植入复合VEGF多肽水凝胶胶原支架、血凝块和多肽水凝胶胶原支架,blank组作为空白对照不植入任何材料,冠方用mta严密封闭。选取6周龄雄性裸鼠30只,于裸鼠背部皮下左右两侧分别植入1个牙根段和皮质骨段,植入8周后取出样本进行组织学评价。结果:1.实验一:he染色显示实验组牙根段管腔内有含细胞和血管的疏松结缔组织形成。组织中的细胞形态清晰,呈长梭形,细胞核深染,为成纤维样细胞,有部分成纤维样细胞沿着牙本质内壁排列。组织中可见较多形态不规则的血管,管腔内可见红细胞充盈。各组新生组织面积与牙根段管腔面积比值的均数分别为12.8%、18.7%、15.4%、15.0%、17.7%,不同组别间根管中再生组织量差别没有统计学意义。2.实验二:he染色显示69.5%的样本管腔内出现新生疏松结缔组织,可见大量细胞,较丰富的血管和毛细血管。细胞形态清晰,呈长梭形,细胞核深染,为成纤维样细胞。牙根段与皮质骨段相同亚组比较,牙根段管腔内可见较多呈长梭形的细胞沿着管壁不规则排列,核深染,dspp染色呈强阳性,提示为成牙本质细胞样细胞,同时cd34在血管样新生组织内皮细胞呈强阳性表达。皮质骨段样本中没有见到细胞沿管腔内壁排列生长。r-vegf组、r-blood组和r-hydrogel组样本的组织可见成牙本质细胞样细胞,r-blank组的样很少有成牙本质细胞样细胞形成。结论:1.根尖孔大小对牙髓再生组织量没有明显的影响。2.牙本质为牙髓再生提供了独特的再生微环境,在新生的组织中有成牙本质细胞样细胞形成,这一独特的功能可能与牙本质内储存的生长因子和牙本质小管的独特结构有关。3.单纯的牙本质矿化微环境难以在管腔内诱导出理想的再生组织,需要与其它支架材料结合使用。
