葡萄籽原花青素分离提纯、组分鉴定及抗氧化性研究

葡萄籽中富含葡萄籽油和原花青素,是一种可供选择的极好的保健品原料。葡萄籽油中含有13%～15%的油脂,其中亚油酸的含量达到76%以上,是一种优质保健用油。葡萄籽中原花青素含量也极其丰富,其中低聚原花青素（二聚体～四聚体,OPC's）有强抗氧化能力,可以清除体内的自由基和活性氧,能预防80多种因自由基引起的疾病包括心脏病、关节炎等,可被广泛应用到药物、化妆品和功能性食品等领域。然而在我国,该方面的理论研究尚处于起步阶段,我们的产品大多为提纯的初级产品,质量不稳定、抗氧化能力不强、价格较低。通过本课题的研究,提出了一套完整的提取葡萄籽油和原花青素的工艺,特别是提出合理的纯化、分离低聚原花青素的方法和工艺。主要结论如下: 1.以超临界萃取技术提取葡萄籽油。通过单因素实验,得到的提取最佳萃取条件为:萃取压力30MPa,萃取温度45℃,萃取时间80min,物料的适宜水分含量约为6%。 2.在超临界萃取技术提取原花青素方面做了初步的理论研究和探索。产物的薄层层析结果显示,在夹带剂甲醇或乙醇存在时可以在一定范围内增加儿茶素及低分子酚酸在CO2流体中的溶解度,且甲醇增加提取率的效果要好于乙醇。进一步以HPLC-MS联检技术分析产物的成分组成,在产物中检测出儿茶素、表儿茶素和两种二聚体,说明在夹带剂甲醇或乙醇存在时提取高抗氧化性的二聚体是可能的。但由于原花青素化学结构的原因,总体提取率仍较低。 3.在溶剂提取的单因素实验基础上通过正交实验,得到脱脂葡萄籽中原花青素的最佳提取条件为:80%的乙醇浸提90min,于温度60℃,pH值5.0,料液比1:6的条件下浸提3次。原花青素粗品的提取率为16.7%,纯度58.3%。 4.研究了大孔树脂柱层析纯化原花青素技术。通过静态和动态吸附、解吸试验筛选出HPD600为最适宜的树脂。同时用Langmuir单层吸附模型拟合比较各树脂的平衡速率常数,获得了良好的相关性,说明大孔树脂对原花青素的吸附主要为单分子层吸附。当上样流速为0.60mL/min,洗脱流速为