免疫捕获LAMP法快速检测大肠埃希氏O157:H7的研究

目的:建立免疫捕获-LAMP快速检测E.coli O157:H7的方法,并探讨其特异性和灵敏度。方法:制备E.coli O157:H7单克隆抗体,运用酶标板捕获富集待测样品中E.coli O157:H7,以编码该菌鞭毛H7特异性抗原的fliC基因作为靶序列,进行LAMP检测,肉眼观察产物颜色变化并判断检测结果。对3株E.coli O157:H7菌和14株非E.coliO157菌进行特异性检测。结果:只有3株E.coli O157:H7菌显示为阳性,其他菌为阴性。该方法检测E.coli O157:H7的灵敏度为2.5cfu/mL,人工污染全脂牛奶中的E.coli O157:H7检出限为8cfu/mL。结论:这种LAMP前处理方法既大大缩短了增菌时间,又提高了检测结果的准确性和稳定性。