长梗木霉外切纤维素酶CBH Ⅱ基因的克隆及表达

被引：11

作者：

王娟

刘海英

朱亚然

舒正玉

吴松刚

黄建忠

机构：

[1] 福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建省现代发酵技术工程研究中心

来源：

药物生物技术 | 2009年 / 16卷 / 02期

关键词：

长梗木霉; 外切纤维素酶; 毕赤酵母; 表达;

D O I：

10.19526/j.cnki.1005-8915.2009.02.001

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

分别以长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)XST1的基因组DNA和cDNA为模板PCR扩增其外切纤维素酶Ⅱ(cellobiohydrolaseⅡ,CBHⅡ)的全长基因cbhⅡ。序列分析表明:cbhⅡ基因全长1583bp,含3个内含子,分别为94～144bp,529～584bp和832～894bp。该基因编码的外切纤维素酶Ⅱ蛋白全长470个氨基酸(其中前24个氨基酸为信号肽)。将全长的cbhⅡ基因连接到pPIC3.5K上,转化毕赤酵母GS115(Pichia pastoris GS115)。重组转化子96h诱导培养,发酵上清液水解pNPC的酶活为18.1U/L。SDS-PAGE检测结果表明:浓缩的重组转化子发酵液较对照菌株的发酵液中,有一明显加强的蛋白质条带,Mr约为67k。

引用

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页数：4

共 9 条

[1]

Outlook for cellulase improvement: Screening and selection strategies [J].

Zhang, Y. -H. Percival ;

Himmel, Michael E. ;

Mielenz, Jonathan R. .

BIOTECHNOLOGY ADVANCES, 2006, 24 (05) :452-481

[2]

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[3]

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