大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制

被引:14
作者
解泉源 [1 ]
赖卫华 [1 ]
刘春梅 [2 ]
孙吉昌 [3 ]
邓省亮 [4 ]
刘成伟 [3 ]
魏华 [1 ]
游兴勇 [3 ]
熊勇华 [1 ]
机构
[1] 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室
[2] 无锡中德伯尔生物技术有限公司
[3] 江西省疾病预防控制中心
[4] 江西省科学院微生物研究所
关键词
大肠杆菌O157:H7; 荧光微球; 免疫层析法; 试纸条;
D O I
暂无
中图分类号
TS207.4 [食品的微生物检验];
学科分类号
083201 ;
摘要
目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论:大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段。
引用
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页码:353 / 357
页数:5
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