5种食用菌多糖理化性质及免疫活性的比较研究

目的:研究平菇、茶树菇、香菇、木耳、金针菇5种食用菌多糖的理化性质和免疫活性,为食用菌的开发利用提供理论支持。方法:采用水提醇沉法提取多糖;采用分光光度法、高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、气相色谱-质谱联用法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)、红外光谱法(infrared spectrometry,IR)分析多糖的理化性质;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定多糖的免疫活性。结果:相同条件下,5种食用菌多糖提取率依次为平菇多糖(Pleurotus ostreatus polysaccharides,POP)3.3 9%、茶树菇多糖(Agrocybe chaxingu polysaccharides,ACP)2.7 1%、金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharides,FVP)2.69%、香菇多糖(Lentinus edodes polysaccharides,LEP)2.3 2%和木耳多糖(Auriculari aauricular polysaccharides,AAP)2.3 1%,它们均由分子质量不同、糖苷键为β-构型的多糖组分组成,均含有甘露糖(mannose,Man)、葡萄糖(glucose,Glc)和半乳糖(galactose,Gal)残基,且ACP还含有鼠李糖(rhamnose,Rha)和阿拉伯糖(arabinose,Ara),AAP还含有少量的木糖(xylose,Xyl);甲基化分析显示不同多糖具有不同的糖苷键连接方式,POP和LEP以→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc为主要连接方式,ACP以→1,6-β-Glc和→1,6-β-Gal为主要连接方式,而AAP和FVP是以→1,4-β-Glc为主要连接方式;体外免疫活性实验结果表明,5种多糖在25～400μg/m L质量浓度范围内无细胞毒性,可不同程度地提高巨噬细胞的吞噬能力和促进巨噬细胞分泌NO、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的能力,其中以→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc为主要连接方式的LEP活性最强,以→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc为主要连接方式的POP次之,以→1,6-β-Glc和→1,6-β-Gal为主要连接方式的ACP效果一般,以→1,4-β-Glc为主要连接方式的AAP和FVP效果最差。结论:5种食用菌多糖具有不同的理化性质和对巨噬细胞的免疫调节活性,且活性大小与多糖是否含有→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc连接方式相关。