采用HPLC测定乳铁蛋白质量浓度的方法研究

建立一种灵敏度高、操作简便的定量分析牛初乳或乳粉中乳铁蛋白的高效液相色谱方法。样品经脱脂、酸法去除酪蛋白和硫酸铵沉淀富集、纤维素滤膜过滤净化等方法进行预处理,采用Shodex IEC CM-825弱阳离子色谱柱分离,以浓度为0.02 mol/L,pH值为7.0的磷酸缓冲盐溶液和浓度为0～1.5 mol/L氯化钠的混合溶液作为流动相,进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,检测波长为280 nm。结果表明:LF的标准曲线方程为y=494439x+25044 R2=0.9991,LF在质量浓度为0.05～4.0 g/L范围内呈线性关系,且LF的平均加标回收率为96.883%,以上结果说明此方法方便、快捷、准确、可靠、重现性好,可用于牛初乳质量浓度或乳粉中乳铁蛋白质量分数的检测。