韭菜酸性磷酸酶的分离纯化及酶学性质

被引:9
作者
孙芳
任美凤
胡瑞斌
唐云明
机构
[1] 西南大学生命科学学院,重庆市甘薯工程研究中心,三峡库区生态环境教育部重点实验室
关键词
韭菜; 酸性磷酸酶; 分离纯化; 性质;
D O I
暂无
中图分类号
TS201.25 [];
学科分类号
083201 ;
摘要
取新鲜韭菜,通过匀浆、缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析等方法纯化,获得韭菜中所含的一种电泳纯的酸性磷酸酶(ACP)。经纯化后的酶溶液比活力为645.83U/mg,纯化倍数达到454.81倍,回收率为10.50%。酶学性质研究表明:该酶的分子质量约为58.97kD;最适反应温度和pH值分别为65℃和5.4;该酶对对硝基苯磷酸二钠(pNPP)的K m值为0.896×10-3mol/L;较高浓度的Mg2+、Mn2+对该酶的激活作用更强;抗坏血酸、甲醇、乙醇、氯仿、异丙醇、Cu2+、Ag+的浓度越大,对该酶的抑制作用越强。
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