苜蓿总皂苷粗提物的提取工艺及其对绵羊瘤胃发酵功能的影响

本论文确立了苜蓿总皂苷含量的测定方法;通过单因子试验设计和正交试验设计确定苜蓿总皂苷的最佳提取工艺条件;然后研究了紫花苜蓿、黄花苜蓿、草原2号苜蓿在不同生育期以及植株的不同部位皂苷含量的变化规律;同时选取4只健康的安装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古半细毛羯羊,在精粗比为3:7的日粮条件下,采用体外批次培养法,添加不同水平的苜蓿总皂苷（0%、1%、2%、4%、6%、8%、 10%）对绵羊瘤胃发酵的影响。其研究结果表明: 1以齐墩果酸（oleanolic Acid,OA）作为标准品,利用紫外分光光度法确定了苜蓿总皂苷的最大吸收波长为545nm,确定苜蓿总皂苷含量的标准曲线方程为Y=10.119X+1.5093（R2=0.9995）。 2在单因子实验的基础上,利用正交试验L9（34）,得到苜蓿总皂苷的最佳提取条件为:固液比1:10,乙醇浓度70%,浸提2次,浸提温度80℃,苜蓿总皂苷的平均总得率为1.58%。 3返青期到初花期,紫花苜蓿植株总皂苷含量>草原2号苜蓿植株总皂苷含量>黄花苜蓿植株总皂苷含量,紫花苜蓿总皂苷含量极显著高于黄花苜蓿（p<0.01）;在盛花期和结荚期,草原2号苜蓿总皂苷含量高于其它两个品种;成熟期时黄花苜蓿总皂苷含量最高。 紫花苜蓿与草原2号苜蓿在结荚期的总皂苷含量显著大于其它生育期（p<0.05）,黄花苜蓿植株皂苷含量在盛花期达到最大。苜蓿植株不同部位的皂苷含量变化均为叶中皂苷含量>植株中皂苷含量>茎中皂苷含量,且总皂苷含量的差异达到极显著水平（p<0.01）。 4添加苜蓿总皂苷有降低pH值、原虫总数和干物质降解率的趋势;增加产气量和NH3-N浓度的趋势;显著提高乙酸、丙酸和丁酸以及TVFA的浓度（p<0.05）,乙酸/丙酸的比值降低,依据产气量、干物质降解率、VFA产量、原虫总数多项指标综合指数确定苜蓿总皂苷的适宜添加量为6%。