苹果果皮中α-法尼烯和类黄酮的提取及其抗氧化能力研究

苹果作为大众消费水果含有大量次生代谢物,a-法尼烯和类黄酮是苹 果果皮中一类重要的次生代谢物质,与果实的品质、贮藏过程中的病害、 昆虫诱导作用有关。 本研究以青香蕉苹果为材料,研究了苹果中的重要次生代谢物质 a- 法尼烯及类黄酮的分离提取和测定技术,并结合外源抗氧化剂,对不同处 理果皮提取物及类黄酮提取物清除 DPPH·自由基的性能进行了探讨,主 要结果如下: 1.初步建立了苹果中 a-法尼烯的提取分离的技术路线,为进一步研 究 a-法尼烯及其生物学效应奠定了基础。 2.改进了 a-法尼烯的测定技术。用紫外光谱法和 HPLC 两种测定方 法测定了果皮中的 a-法尼烯含量。HPLC 测定法比紫外光谱法的测定结果 更精确。引起紫外光谱法测定值偏高的原因主要有:测定液中的其它物质 在 232nm 处也有吸收峰,使 a-法尼烯的吸收峰比实际吸收峰高。其次, 提取液在 210nm 处存在一强吸收峰,此峰可能会干扰并拔高 232nm 处的 吸收峰而使紫外光谱法测定的结果比实际值偏高。同时测定比较了不同处 理果皮的 a-法尼烯含量。 3.建立了苹果果皮总黄酮的提取技术并测定总黄酮含量。采用正交 试验筛选了果皮总黄酮温浸法提取的最佳提取条件:水浴温度为 65℃, 1 李 红 苹果果皮中 a-法尼烯和类黄酮的提取及其抗氧化能力研究 乙醇浓度为 65%,提取时间为 2h,固液比为 1:20。此条件下测得总黄酮 得率为 3.66%。同时测定比较了果皮阴面和阳面的总黄酮含量,果实阳面 果皮的总黄酮含量比阴面果皮总黄酮含量高。 4.用 DPPH·法测定了总黄酮提取物、果皮水溶性提取物和脂溶性 提取物以及其它不同处理果实的清除自由基能力。通过试验证明,苹果果 皮提取物具有较强的清除 DPPH 自由基的能力,说明苹果提取物含有能清 除羟基自由基、烷基自由基或者过氧自由基的抗氧化物质。果皮水溶性提 取物的抗氧化能力比脂溶性提取物的抗氧化能力强;果皮阳面提取物的抗 氧化能力比阴面果皮提取物抗氧化能力强。 5.外源抗氧化剂清除 DPPH·能力的研究表明,芦丁和槲皮素对 DPPH·均有较强的清除能力,在一定浓度范围内,清除 DPPH·的能力 随抗氧化剂物质量的增加而增加,槲皮素具有较强的清除 DPPH·自由基 的能力。DPA 是一种传统用于虎皮病防治的抗氧化剂,也具有清除 DPPH·的能力。