人类的生存环境中正面临着多种潜在的雌激素来源,直接或间接地影响整个生物界的平衡与协调。我国已禁止在食品动物中使用雌激素,但仍有养殖户非法使用,已严重影响了人民身体健康和我国出口贸易。而到目前为止,我国只对畜、禽肉中的己烯雌酚制定了国家标准检验方法,其它各类的雌激素均无国家标准检验方法,因此有必要建立一套完整灵敏的雌激素类物质检测手段,便于对动物性食品和水中的相关激素进行统一有效的监控。
本研究建立了可用于畜禽肉和水中同时检测雌三醇、雌二醇、炔雌醇、雌酮和己烯雌酚的高效液相色谱方法。前处理方法是:畜禽肉样品经三羟基甲基氨基甲烷溶液和甲醇提取,Oasis HLB固相萃取小柱(6 mL/200 mg)浓缩净化;水样直接经Alhech Extract-clean columns C18固相萃取小柱(200 mg/4.0 mL)浓缩净化。反相色谱检测,色谱条件为:Eclipse XDB-Cl8 5μm,4.6 mm×150 mm色谱柱;流动相:乙腈-水,采用梯度洗脱方式0～3 min乙腈/水(v/v,35:65),3～7 min乙腈由35%升至52%,保持8 min;流速:1.0 mL/min;AUFS:0.01;DAD二极管阵列检测器,检测波长210 nm;柱温:25℃。此条件下,五种雌激素分离效果好,标准曲线线性良好,相关系数r>0.9993,方法的检出限:水样为14～18 ng/L,畜禽肉为3.9～4.9 ng/g,有较好的准确度和精密度,回收率为68%～106%,相对标准偏差小于6%。
用以上方法对鸡肉、猪肉和地下水、地面水等不同样品进行检测,共检出雌二醇、炔雌醇、雌酮和己烯雌酚四种雌激素,并采用液相色谱-质谱联用法对阳性样品进行了确证实验,初步探讨了5种雌激素的裂解途径及其合理化碎片,对本实验方法的确立提供了充实的依据。结果表明本实验方法操作简便,适于动物性食品和水中痕量雌激素物质的分析。
