赤芍保肝退黄药效物质基础研究

探索黄疸型肝炎的治疗方法和治疗药物一直是肝病领域研究的热点之一。长期的临床探索证实,传统的中草药对肝病有独特的治疗效果,其中赤芍以其显著的保肝退黄作用受到了国内外学者的广泛关注。 虽然赤芍治疗黄疸型肝炎的临床和实验研究均取得了一定进展,但是迄今为止的研究仍然停留在单味药或复方层次,其药效物质基础并不十分清楚。有鉴于此,本课题以赤芍总苷及其主要成分芍药苷为主要目标,采用化学分离和药效跟踪相结合的方法,对赤芍的保肝退黄药效物质基础进行了筛选研究。 论文分文献综述和实验研究两大部分。 第一部分,文献综述。引用文献117篇,对赤芍的化学成分、提取分离工艺和药理作用等现代研究进展进行了综述,在此基础上简要介绍了本课题的研究思路和方案设计。 第二部分,实验研究。包括以下5个部分： 1、赤芍保肝退黄活性部位初步筛选 赤芍饮片70%乙醇回流提取,药渣烘干加水提取,分别得醇提部位和水提部位；α-荼异硫氰酸酯(ANIT)诱导小鼠胆汁淤积黄疸模型,以该模型对醇提部位和水提部位进行药效试验,结果表明,醇提部位为活性部位。 2、赤芍醇提部位成分分析及组分分离 建立了HPLC法同时测定芍药苷、芍药内酯苷的方法,并对赤芍饮片及醇提部位和水提部位进行了的含量测定,结果表明,芍药苷、芍药内酯苷等单萜苷类化合物基本转移至醇提部位。以芍药苷、芍药内酯苷为指标,考察了大孔树脂从醇提浸膏中纯化赤芍总苷的工艺。醇提浸膏加水溶解分成沉淀部分(组分Ⅰ)和上清液,上清液用大孔树脂分离为赤芍总苷(组分Ⅱ)和其余部分(组分Ⅲ)。测定3个组分中芍药苷、芍药内酯苷的含量,结果表明,组分Ⅱ中芍药苷和芍药内酯苷含量分别为组分Ⅰ的5.29倍和25.74倍,组分Ⅲ几乎未测出这两个成分。 3、赤芍醇提部位中的活性组分筛选 采用ANIT诱导的小鼠胆汁淤积黄疸模型对赤芍总苷、沉淀部分和其余部分进行药效试验,以小鼠血清生化指标及肝组织病理变化的半定量分析为指标,筛选活性组分。结果表明,赤芍总苷、沉淀部分大部分药效指标较模型对照组明显改善,其余部分所有指标均与模型对照组无统计学差异。 4、赤芍总苷保肝退黄作用机制初步研究 观察赤芍总苷对胆汁淤积黄疸模型小鼠戊巴比妥钠睡眠时间、胆汁分泌量及肝内尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(Uridine Diphosphate Glucuronyltransferase,UDPG-T)活性的影响。结果表明,与模型对照组比较,赤芍总苷3个剂量组、苯巴比妥钠组睡眠时间均明显缩短,中、高剂量组胆汁分泌量显著增加,3个剂量组肝组织UDPG-T活性均明显提高。提示赤芍总苷的保肝退黄作用机制可能与增加胆汁分泌量,增强肝微粒体氧化酶活力,增加肝脏解毒能力,提高UDPG-T活性,促进胆红素代谢等有关。 5、芍药苷的保肝退黄作用研究 观察芍药苷对胆汁淤积黄疸模型小鼠血清生化指标及肝组织病理改变的影响。结果表明,芍药苷各剂量组大部分血清指标均较模型对照组明显降低,肝组织病理变化明显改善,提示芍药苷具有一定的保肝退黄作用。