芦笋茎叶中黄酮类化合物和多糖的提取纯化研究

从蔬菜原料中提取活性成分是蔬菜深加工发展的方向之一，不仅可以增加蔬菜产品的附加值，而且可以充分利用蔬菜生产过程中的废弃资源。芦笋是我国主要出口创汇蔬菜之一，其生产过程中有大量的茎叶被作为废料遗弃，造成了环境的污染并使资源流失。本论文研究了芦笋茎叶中黄酮类化合物和多糖的提取和纯化工艺，并分别进行了初步鉴定和药效学实验，为工业化生产提供了实践参数和理论依据。主要研究结果如下： 1．研究探索不同溶剂、原料颗粒大小以及提取技术对芦笋黄酮类化合物提取效果的影响，采用正交试验就热回流提取、微波法提取技术进行比较并作回归分析，建立了数学拟合模型。结果表明：回流法提取最佳工艺条件为：80℃、55％乙醇、每次提取1h、料液比1：15，模型为y＝10.0565-0.9114X1+0.0094X1～2+58.0883X2-42.5978 X2～2+1.1965 X3-0.7377X3～2+6.0177X4-1.0244X4～2；微波法最佳工艺为：乙醇浓度80％，pH10，提取时间为5min，料液比1：25，数学模型y=-9.1803+1.6378X1-0.1509X1～2+4.5216X2-1.1894X2～2+6.9266X3+1.3543X4。就各种方法做横向比较，推荐以超声波热回流提取法作为芦笋黄酮类化合物提取的最佳方法。 2．采用大孔树脂法分离芦笋茎叶醇提物，研究了上样液浓度、吸附和洗脱速度及洗脱剂浓度梯度等对黄酮类化合物的影响，确定最佳的纯化工艺参数。结果显示：NKA-Ⅱ可以较好地分离芦笋茎叶醇提物，黄酮类化合物在该柱材料上的吸附率达87.56％，洗脱率高达98.79％，初步纯化后芦笋黄酮干含量由2.25％上升至11.3％。 3．试验研究了芦笋茎叶多糖常规提取工艺，分别考察了醇沉时间、醇沉浓度、分步醇沉及去蛋白方法等对多糖得率及纯度的影响。研究结果表明：芦笋多糖提取工艺以90℃、1：15料液比、提取3h（2次）为最佳；比较超声波和微波提取法，以微波法效果最佳，多糖提取率可达到1.988％。以80％乙醇在4℃沉淀9h可完全沉出提取液中多糖，选择Alcalase 3.0水解去蛋白，处理最佳条件为：0.001g／ml的剂量，50℃酶处理90min，去蛋白后多糖纯度从13.4％上升至19.02％。 4．采用分步醇沉和超滤技术初步分离纯化芦笋多糖，前者确定芦笋多糖主要分布在50％和80％醇沉部分，以50％沉出数量居多；后者测定芦笋多糖的分子量和进行定