茯苓多糖的化学修饰与其抗氧化活性研究

经过化学修饰的多糖具有许多独特的生物活性,引起了人们的广泛关注。通过对多糖的化学修饰,引入一些特定的化学基团,在一定程度上增加多糖的水溶性、改变多糖的结构、理化性质、及生物活性。茯苓多糖约占茯苓菌核的70%～90%,但是水溶性较差,基于此对茯苓多糖的结构进行化学修饰以增加其水溶性,这对于茯苓多糖构效方面的研究及药物开发具有重要的意义。 本文以茯苓药材为原料,采用单因素和正交实验,对影响碱法提取茯苓多糖的因素进行研究。实验结果表明,碱提取的最佳工艺条件为提取温度5℃,固液比1：30,碱溶液浓度0.75mol/L,提取时间8h,所得碱溶性茯苓多糖提取率为83.53%。 以氢氧化钠为碱化试剂,一氯乙酸为醚化试剂,制备出水溶性羧甲基茯苓多糖,并对其制备工艺进行了优化。结果表明,羧甲基茯苓多糖制备的最佳工艺条件为：反应温度45℃,反应时间5h,氢氧化钠/茯苓次聚糖摩尔比为4.8：1,氯乙酸/茯苓次聚糖摩尔比为2.1：1。 采用氯磺酸-吡啶法,分别以吡啶、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜为溶剂制备水溶性硫酸酯茯苓多糖。结果表明以吡啶为溶剂,制备硫酸酯化茯苓多糖得率和取代度均最高(得率为108%取代度为1.33),在相同的反应条件下,对羧甲基茯苓多糖进行硫酸酯化修饰(得率为80%,羧甲基和硫酸基团取代度分别为0.95和0.85)。 在此基础上研究了茯苓多糖衍生物的抗氧化活性,并采用普鲁士蓝法检测样品还原力,水杨酸法检测羟基自由基(·OH),邻苯三酚自氧化检测超氧阴离子自由基(·02-),结果表明茯苓多糖衍生物具有一定的还原力,并对羟基自由基和超氧阴离子自由基有一定的清除作用。