茶多糖是茶叶中继多酚以后发现的另一种重要的功能性成分,具有很好的抗氧化和降血糖活性。茶多糖特性和生物活性具有品种多样性。本研究采集实验室前期研究初筛出的高、低活性茶多糖茶树代表品种,通过茶多糖活性筛选验证,筛选出一种高抗氧化活性茶多糖和一种低抗氧化活性茶多糖,通过研究其体外清除自由基活性、抗脂质过氧化作用以及体内动物实验系统的比较和评估了二者的抗氧化活性差异,并通过动物降血糖活性实验验证,探讨茶多糖的体内外抗氧化活性差异以及抗氧化活性与降血糖作用之间的关联及其可能机理,为茶多糖活性评价体系的建立、茶多糖构效关系的阐明和高多糖活性茶树品种的筛选以及功能性茶多糖产品的开发提供依据。主要研究结果如下：
1不同品种茶多糖活性筛选验证
采集实验室前期研究筛选出的高活性和低活性茶多糖茶树代表品种13个,测定其清除·OH和O2-··能力差异,进行了活性高低验证。结果表明,13个不同品种茶多糖对·OH和O2-··清除能力均有极显著差异,各品种对两种自由基的清除能力高低表现出一致性。对·OH清除能力高的品种,对O2-·的清除能力也较高,对·OH清除能力低的品种,对O2-·的清除能力也相对较低。综合各品种清除两种自由基实验结果,试验筛选出T01品种为高多糖活性茶树品种,T09品种为低多糖活性茶树品种。
2茶多糖抗氧化作用研究
(1)采用D-脱氧核糖-铁体系法、黄嘌呤氧化酶法、DPPH法等比较研究了筛选出的不同品种茶多糖的体外清除自由基活性。结果显示,T01-TPS和T09-TPS都具有良好的清除自由基活性。T01-TPS和T09-TPS清除·OH的IC50值分别为1.14mg/mL、2.47 mg/mL;清除O2-·的IC50值分别为0.68 mg/mL和2.94 mg/mL;清除DPPH自由基的IC50值分别为0.18 mg/mL和0.09 mg/mL。
(2)研究了不同品种茶多糖的体外脂质抗氧化活性。结果显示,T01-TPS和T09-TPS均具有较好的脂质抗氧化能力,能够抑制H202诱导的体外红细胞氧化溶血,能够有效抑制肝组织匀浆MDA的生成和肝线粒体的肿胀。在抗脂质过氧化检测的三个方面,T01-TPS效果均优于T09-TPS。
(3)采用四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型研究了茶多糖的肝保护和抗氧化作用。结果显示,不同品种茶多糖对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤具有良好的保护作用。T01-TPS和T09-TPS均能使肝损伤小鼠血清中ALT活性和AST活性降低,Alb含量升高；能降低肝损伤小鼠肝组织MDA和NO含量,能明显提高肝损伤小鼠肝组织SOD、CAT和GSH-Px活性。肝组织病理观察也表明T01-TPS和T09-TPS能不同程度改善CCl4对肝组织细胞的损伤。在肝保护和抗氧化方面,T01-TPS效果明显优于T09-TPS。提示茶多糖能通过提高机体抗氧化能力而起到肝保护作用。
上述结果表明,在体外清除自由基和抗脂质过氧化能力以及肝保护和体内抗氧化作用方面,T01-TPS均强于T09-TPS,这可能与二者具有不同的结构特征有关。
3茶多糖降血糖作用研究
研究了茶多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。腹腔注射200 mg/kg四氧嘧啶造小鼠糖尿病模型,灌胃给药14d,测定给药前后小鼠的空腹血糖值、小鼠体重与免疫器官重量,并进行了糖耐量实验。结果表明,T01-TPS和T09-TPS均能较好地降低糖尿病小鼠血糖水平,呈现一定的量效关系,并能减缓糖尿病小鼠消瘦和多食多饮症状；T01-TPS和T09-TPS能使糖尿病小鼠的血糖曲线下面积明显下移,提高糖尿病模型小鼠的葡萄糖耐量。同时,T01-TPS和T09-TPS能提高糖尿病小鼠的胸腺指数和脾脏指数,促进糖尿病小鼠脾脏和胸腺的发育。提示T01-TPS和T09-TPS对四氧嘧啶诱导的小鼠实验性糖尿病有明显的降血糖作用并具有增强免疫调节能力的作用,T01-TPS效果优于T09-TPS。
