鲍曼不动杆菌临床分离株耐药性及其β-内酰胺酶类型和基因型的研究

目的：研究我院鲍曼不动杆菌对临床常用12抗菌药物的耐药情况以及耐药性与常见β-内酰胺酶类型和编码基因之间的关系。 方法：对2005年1月-5月、2006年2月-6月我院临床分离的共120株鲍曼不动杆菌通过琼脂对倍稀释法进行MIC测定；使用Cefinase纸片法进行β-内酰胺酶检测；采用改良三维试验大平皿法对β-内酰胺酶阳性菌株进行β-内酰胺酶分型检测；根据耐药表型和产β-内酰胺酶类型的不同，分别对耐IMP、FOX、CAZ和CTX的菌株进行碳青霉烯酶基因blaOXA-23、blaOXA-24的PCR检测和AmpC酶、ESBLs基因的多重PCR检测。结果：除IMP外，120株鲍曼不动杆菌对其余11种抗菌药物的耐药率均超过50％。110株鲍曼不动杆菌对三种以上抗菌药物耐药，占91．67％；这些耐药菌株大多分离自痰液，主要来自于ICU病房。120株鲍曼不动杆菌中，Cefinase纸片法检测到114株产β-内酰胺酶（95％），其中63株（55．24％）能经改良三维试验大平皿法进行酶分型。在这63株鲍曼不动杆菌中，单独产碳青霉烯酶4株（3．51％）、产ESBLs 15株（13．16％）、产AmpC酶5株（4．39％）及产IRTs 18株（15．78％）；同时产碳青霉烯酶和ESBLs的有5株（4．39％），产AmpC酶和ESBLs的有9株（7．89％），同时产碳青霉烯酶和IRTs的有7株（6．14％）。在IMP中介或耐药的53株鲍曼不动杆菌中，经三维试验检测产碳青霉烯酶组16株（均为非金属碳青霉烯酶），PCR检测到11株携带blaOXA-23；三维试验检测不产碳青霉烯酶组37株，PCR检测到2株携带blaOXA-23；两组均未发现blaOXA-24。对CTX／CAZ均耐药的71株鲍曼不动杆菌中，三维试验检测产ESBLs组29株，多重PCR检测到5株阳性，分别携带blaSHV、blaCTX-M-3、blaCTX-M-14的各一株，同时携带blaSHV和blaCTX-M-14的2株；三维试验检测不产ESBLs组42株，多重PCR全部阴性。对FOX中介或耐药的109株鲍曼不动杆菌中，三维试验检测产AmpC酶组14株（占12．84％），多重PCR仅检测到1株阳性，经克隆后序列分析证实为blaCIT的上游部分序列；三维试验检测不产AmpC酶组95株，多重PCR检测到2株携带blaDHA。结论：我院鲍曼不动杆菌多重耐药常见，β-内酰胺酶产生率高，同时产多型β-内酰胺酶常见。三维试验结果以产ESBLs最多且复杂，其次是IRTs。碳青霉烯酶较单一，绝大部分携带blaOXA-23，是主要的基因型，考虑与医院感染流行有关；ESBLs、AmpC酶两种β-内酰胺酶基因的多重PCR阳性率均低，考虑与引物选择有关，故其具体产酶类型有待进一步拓展研究。本研究建立的改良三维试验大平皿法能同时进行几种常见β-内酰胺酶的筛选分型，取得了很好的效果，其推广应用的价值有待进一步研究证实。