功能性食品添加剂—谷胱甘肽分离纯化工艺的研究

谷胱甘肽(GSH)是一种生物活性三肽。GSH在生物体内具有多种重要的生理功能,在临床医药、食品工业、体育运动及有关生物研究领域都有着广泛的用途。本文对产朊假丝酵母(Candida utilisWSH 02-08) GSH积累株酵母细胞中GSH的提取分离和纯化进行了研究。研究的主要内容如下: 1.研究确定了实际体系中影响谷胱甘肽稳定性的主要因素是pH值和温度:pH值为1～2谷胱甘肽较稳定;谷胱甘肽在常温下保藏两天相对较稳定,在20min内100℃下提取液GSH时,其损失率较小。因此,在对GSH进行分离纯化过程中应尽量避免较高pH和高温。 2.研究了应用超滤技术去除富含谷胱甘肽的产朊假丝酵母提取液中的蛋白质的最佳工艺操作参数;同时为提高谷胱甘肽回收率,比较了间歇稀释过滤(DD)和连续稀释(CD)过滤两种稀释方法的优缺点,最终确定采用间歇稀释过滤和超滤相结合的方法分离纯化谷胱甘肽。另外,实验还确定了超滤膜最佳的清洗方法。 3.本实验研究了超滤技术对谷胱甘肽在阳离子交换树脂(001×7)上的交换行为的影响。同时对影响固定床离子交换吸附的条件的研究,确定了最佳上柱和洗脱的工艺参数,最终的GSH回收率达到80.2%,蛋白质去除率60%,GSH浓缩倍数达2.5倍(高峰时达到8.3倍),纯化倍数为3.9倍,获得了良好的分离效果。 4.在上述研究的基础上,通过改进提取工艺,对谷胱甘肽的工业化生产路线进行了简化,使得富含GSH的产朊假丝酵母经提取、离交、浓缩和干燥简单四步主要单元操作,得到含量为11.3%谷胱甘肽复合产品。