黑木耳多糖的提取、功能及单糖组成的研究

本研究首先对黑木耳多糖提取工艺进行研究优化选择最合适的工艺；采用最优的提取工艺条件提取不同的黑木耳多糖,检测黑木耳多糖的功能活性及比较不同黑木耳多糖间的功能活性是否存在着差别；最后检测各种黑木耳多糖的成分组成,分离纯化多糖并检测各纯化组分的单糖组成。研究结果表明： 1、研究采用热水浸提法、酶解提取法、超声波提取法及微波提取法四种黑木耳多糖提取方法,进行优化对比实验。确定黑木耳多糖最终工艺路线：采用热水浸提法,黑木耳进行粉碎后加入1：30(g/g)的料水比,置于100℃中浸提3h,后采用4000r/min离心20min,取上清液,滤渣重新再浸提一次,合并上清液,浓缩；浓缩液用Sevag法进行脱蛋白重复5次,再用3倍无水乙醇沉淀12h,得到沉淀洗涤、脱色、浓缩、烘干粉碎得到黑木耳多糖。 工艺过程中浸提得到的提取率为81.616(g/100g)；经过脱蛋白后多糖保留率为86.900±3.700(g/100g)。浸提最后得到的黑木耳多糖的多糖含量为63.404±1.035(g/100g),蛋白含量为1.410±0.092(g/100g),可判断多糖中有糖蛋白存在。2、本研究的实验结果证明百色、福建及四川三种干黑木耳提取得到的多糖都具有一定的功能活性,且不同的黑木耳多糖活性存在着一定的差 百色黑木耳多糖(B)具有降甘油三脂、减肥、通便及可能具有降血糖功能,福建黑木耳多糖(F)具有降甘油三酯、减肥作用,四川黑木耳多糖(S)具有降甘油三脂、减肥及可能具有降血糖功能。但三种多糖都无法判断是否具有降血脂作用。 而三种多糖在同种功能活性的差异为：降甘油三脂的作用：S≥B>F；减肥功能：B>F>S；通便功能仅B高剂量具有；降血糖功能：S>B。 3、研究表明：三种黑木耳成分组成存在着差别,三者在粗多糖、蛋白等含量上都存在着显著性的差异；不同产地的黑木耳通过相同热水提取方法得到的黑木耳多糖的成分组成也存在着差别：三种多糖含量不同但不存在着显著性差异；S的蛋白含量显著高于其他两种多糖；B的糖醛酸含量显著高于S的糖醛酸含量,但都与F无显著性差别。4、三种多糖都通过DEAE-纤维素层析柱分离、透析、葡聚糖凝胶G50层析柱进一步纯化后酸水解进行单糖组分检测得到的结果为：B得到5个组分分别为BⅠ(鼠李糖、甘露糖、葡萄糖)、BⅡ(鼠李糖)、BⅢ(鼠李糖、葡萄糖)、BⅣ1(鼠李糖)和B1V2(未检测出相应单糖),BⅡ含有蛋白,因此为糖蛋白；F得到2个组分分别为FⅠ,Ⅱ(鼠李糖、木糖)和Fm(鼠李糖),FⅠ,Ⅱ含有蛋白,因此为糖蛋白。S得到4个组分分别为SⅠ(鼠李糖、甘露糖)、SⅡ,Ⅲ(鼠李糖)、SⅣ,Ⅴ1(鼠李糖)和SⅤ2(鼠李糖、甘露糖、葡萄糖),其中SⅠ、SⅣ,Ⅴ1含有蛋白,因此为糖蛋白。