牡丹和芍药组织培养的研究

本试验以牡丹和芍药为材料,主要研究了牡丹的胚培养、芽培养和影响试管苗玻璃化的因素,并且研究了芍药的休眠芽培养、愈伤组织的诱导和褐化的防止,结果如下: 1.牡丹胚培养 以‘凤丹’成熟胚为外植体,研究发现不同的培养基对牡丹胚萌发率有明显的影响,MS可以作为‘凤丹’胚培养的基本培养基,‘凤丹’胚在培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+GA3 1.0 mg/L上的萌发率最高,MS+6-BA 1.0mg/L+KT 1.0 mg/L是适合试管苗继代培养的培养基,试管苗在培养基1/2MS+IBA 2.0 mg/L上的生根率达到43.2%,牡丹种子经过45d的低温处理,胚萌发率有明显的提高。 2.牡丹芽培养 以牡丹休眠芽为材料,采用0.1% HgCl2 10min进行消毒既可减少污染又能减少试管苗的玻璃化。不同浓度的6-BA对不同牡丹品种休眠芽萌发率的影响不同。利用正交设计对‘洛阳红’试管苗增殖试验进行了研究,结果表明6-BA和KT是‘洛阳红’试管苗增殖过程中重要的生长调节物质,‘洛阳红’试管苗增殖的最优组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,增殖系数为2.15。不同品种在相同培养基上的增殖系数有明显差异。‘洛阳红’试管苗在培养基1/2MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L中的生根状况较好,生根率可以达到82.5%,两步生根法可以提高试管苗的生根率。 3.牡丹试管苗玻璃化的防止 以MS为基本培养基,研究牡丹品种、琼脂、6-BA、大量元素和蔗糖浓度、光照等因素对试管苗玻璃化的影响表明,不同品种的牡丹试管苗在组织培养过程中出现不同程度的玻璃化,增加培养基中琼脂浓度、降低6-BA和大量元素的浓度、增加光照强度或采用自然光照均可以有效地降低牡丹试管苗玻璃化的发生。 4.芍药休眠芽培养 以芍药休眠芽为材料,2月份是芍药休眠芽采集的最佳时期。不同品种和不同培养基对芍药休眠芽萌芽率的影响有明显的不同,1/2MS比较适合作为诱导芍药休眠芽萌发的基本培养基。‘种生粉’试管苗增殖的最优组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,增殖系数为2.39。不同浓度的IBA对试管苗的生根率、根长和生根数都有一定的影响,芍药试管苗在培养基1/2MS+IBA 2.0 mg/L中的生根效果最好,生根率可以达到58.0%。 5.芍药愈伤组织的诱导和愈伤组织褐化的防止 以‘种生粉’为试验材料,比较不同外植体,不同基本培养基类型,不同激素组合对愈伤诱导率的影响表明,以试管苗叶柄为外植体,在MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6 g/L的培养基中诱导率最高可达80.0%;抑制褐化的研究表明,1/2WPM为最佳基本培养基,AgNO3的防止褐化效果最好;黑暗和低温都能不同程度的降低褐化的程度。