TaqMan探针实时定量PCR检测肉中金黄色葡萄球菌的研究

被引:6
作者
邵美丽 [1 ]
许岩 [1 ]
刘思国 [2 ]
赵燕丽 [1 ]
孔保华 [1 ]
机构
[1] 东北农业大学食品学院
[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物细菌病研究室
关键词
TaqMan探针; 金黄色葡萄球菌的nuc基因; 肉; 荧光定量PCR;
D O I
暂无
中图分类号
TS251.7 [产品标准与检验];
学科分类号
083203 ;
摘要
根据GenBank公布的金黄色葡萄球菌的nuc基因序列设计一对引物和一条TaqMan探针,在分析其特异性基础上,构建阳性重组质粒进行荧光定量PCR扩增,制备标准曲线,分析方法的敏感度。进一步将该方法应用到人工染菌肉样中,分析其最低检出限。结果显示该方法对5株金黄色葡萄球菌均可产生特异性扩增曲线,其他6株非单增李斯特菌不产生扩增曲线,表明该方法具有较强的特异性。对阳性重组质粒定量扩增所建立标准曲线的相关系数为0.997,敏感度为1.87×101拷贝.μL-1。该法对人工染菌肉样中金黄色葡萄球菌的最低检出限为2.0×102cfu.g-1。该方法特异性强、敏感性高,可为肉中金黄色葡萄球菌的快速、准确的定量检测奠定基础。
引用
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