基于微滴数字PCR技术的婴幼儿配方乳粉中双歧杆菌定量检测及应用

应用微滴式数字聚合酶链式反应（droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR）技术，建立婴幼儿配方乳粉中双歧杆菌定量检测方法。以双歧杆菌的单拷贝特异性基因rpsL为目标基因设计引物探针，对ddPCR条件进行优化，考察方法的特异性、灵敏度和重复性，并与平板计数方法进行对照验证。结果表明，建立的方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。细菌纯培养液的检出限为296 CFU/mL，模拟样品检出限为7 300 CFU/g，不与10种近缘乳酸菌发生交叉反应，且重复性较好，采用已建立的ddPCR方法和平板计数方法对市售婴幼儿配方乳粉样品进行检测，2种方法测定值结果偏差小于10%，结果一致性较好。本研究建立的ddPCR方法对婴幼儿配方乳粉中的双歧杆菌定量检测能够更快速、灵敏、准确，具有一定的应用前景。