内生解淀粉芽孢杆菌TB2内切β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆和原核表达分析

被引：7

作者：

范晓静 ^{[1
]}

邱思鑫 ^{[2
]}

胡方平 ^{[3
]}

机构：

[1] 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室

[2] 福建省农科院蔬菜研究中心

[3] 福建农林大学植物保护学院

来源：

热带作物学报 | 2008年 / 04期

关键词：

内生解淀粉芽孢杆菌; β-1,4-内切葡聚糖酶基因; 克隆; 大肠杆菌表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q93 [微生物学]; Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071005 ; 100705 ; 071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

以内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株基因组为模板,克隆了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶基因的ORF。测序结果表明该ORF全长1 500 bp,编码499个氨基酸,分子量为55.07 ku,等电点为7.83。Blast同源性分析结果表明,该序列与GenBank登录的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis M28332)纤维素酶核苷酸序列的同源性最高(98%),其氨基酸同源性也达98%,已被GenBank收录(Accession number)。用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切目的片段和表达载体pET-29a(+)后相连接,构建重组表达载体pET-glu,并导入BL21细菌中表达。酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在59 ku左右有融合蛋白带,该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.4,为中性纤维素酶。实验结果为进一步研究内生解淀粉芽孢杆菌TB2纤维素酶的功能和应用打下了基础。

引用

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页数：7

共 9 条

[1] 枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶的纯化及酶学性质附视频 [J].