采用反相高效液相色谱系统,通过对6种目标儿茶素标准品和样品的HPLC分离检测条件的探索及优化,包括洗脱方式的选择、流动相种类及比例的优化、pH值、添加剂种类、进样量等因素对分离的影响,最终选择检测波长为210nm、pH值为3.0、反相梯度洗脱的分离条件,将6种目标儿茶素与茶叶样品中的其他物质分离开来。
样品提取以6种目标儿茶素总量为考察目标,根据儿茶素在高温条件下提取率高但容易氧化的特点,优化了茶叶样品的前处理方法,即用一定浓度的抗坏血酸水溶液作溶剂来抑制目标儿茶素的氧化以提高提取率。实验结果表明该方法对目标物的提取量为375.80μg/mL,高于国家标准方法以及传统方法。
方法验证是检验和完善方法很重要的一部分。通过峰的专属性研究、准确度、精密度、线性、范围、检出限、定量限、稳定性研究来考察方法。结果表明,方法中各项验证目标良好;在此基础上,对不同的实际茶叶样品进行分析,该方法均能满足定性定量要求。
本文建立及发展了茶叶中6种目标儿茶素的高效液相色谱分析检测方法,对于目标物质的检测有一定的参考价值。