羊栖菜多糖的提取和纯化研究

羊栖菜多糖(简称SFP)是从马尾藻科植物羊栖菜(Sargassum fusiforme(Harv.)Setchel)中提取得到的，具有抗肿瘤、抗凝血、降血糖、提高肌体免疫功能等生理活性。本文研究用水提法、酸提法、酶法提取羊栖菜多糖，考虑到提取温度、时间、加水量、加酶量等因素的影响，用正交试验优化酶法提取条件。酶法提取的最适温度为50℃，最适pH值为3.0，提取时间为3hr，加酶量为纤维素酶(16000 U／g)8％，果胶酶(20000 U／g)4％。为适应工业化生产需要，确定水提法为煮沸提取时间3hr，提取液pH值为3.0，固液比为1：40。用酶法结合高温浸提多糖提取的工艺条件是：加纤维素酶量为(16000U／g)8％，加果胶酶量为(20000 U／g)4％，pH3.0，酶解时间为3hr，酶解温度为50℃；浸提温度120℃，浸提时间3hr，固液比1：40。采用该工艺的粗多糖提取得率达14.88％，比热水浸提工艺的粗多糖得率提高了117.23％，比资料介绍的四次浸提法提高了75.06％。 本文系统地研究了羊栖菜粗多糖中蛋白质的分离方法，先后选用了Sevag法、酶法结合Sevag法、三氯乙酸法、1万分子截留量膜超滤、阴阳离子交换树脂法。发现用弱碱性阴和弱酸性阳离子交换树脂串联脱除粗多糖中蛋白质，效果理想，蛋白脱去除率可达91.76％，多糖回收率为92.56％，其中(多糖含量／蛋白含量)值高达42.27，经1万截留分子量透析膜透析，最后冷冻干燥后，得到淡黄色的羊栖菜多糖精粉，其中多糖含量达90.27％，蛋白质含量仅为 浙江工业大学硕士学位论文 羊栖菜多糖的提取和纯化研究 3.巧%。该方法还起到部分脱色效果。 将脱蛋白后的多糖精粉用SePhadexG一200葡聚糖凝胶分离成大分子量多 糖部分和小分子量多糖两部分。大分子量多糖部分用SePhacy1S一400共聚糖凝 胶分离，得到一个分子量相当大的组分，经凝胶HPLC纯度鉴定为均一性物 质，命名组分Fl，该组分含量占多糖精粉的28.45%;小分子量多糖部分进行 SePhadexG一1 00葡聚糖凝胶柱层析，结果表明主要有三个组分fl、几、。， 经凝胶HPLC标准分子量对照分析，三个组分分子量分别为8.2万、5.6万和 1.4万;经计算，比例为:37.4%:15.1%:475%。 本实验研究有效地分离了羊栖菜粗多糖中蛋白质，制得羊栖菜多糖精粉， 为羊栖菜在保健食品和药物研究和开发方面提供了良好的基础，同时为羊栖 菜多糖提取和分离的工业化研究和生产提供了理论依据。