芦笋中黄酮和多糖的复合提取及其抗氧化活性研究

黄酮类化合物和多糖是芦笋茎叶中主要的天然活性成分,从芦笋中提取这些活性成分是芦笋深加工发展的方向之一,不仅可以增加芦笋产品的附加值,而且可以充分利用芦笋加工过程中产生的下脚料,减少对环境的污染。本论文主要研究了芦笋中黄酮类化合物和多糖的复合提取及纯化工艺,同时测定了它们的抗氧化活性,并对芦笋黄酮与多糖之间相互作用的机理作了初步探讨,为芦笋产品的进一步开发提供一定理论依据。通过上述实验,得出以下结论： 1、以绿芦笋为原料,对芦笋中黄酮类物质和多糖的复合提取工艺进行了探讨。结果表明,芦笋中总黄酮的最佳提取条件为乙醇浓度70%,料液比1：25,在80℃条件下提取2h(提取2次),在此条件下黄酮得率为0.85%；在黄酮浓缩液中加入3倍体积的95%乙醇进行沉淀,将沉淀分离经真空干燥得到粗多糖,多糖得率为1.92%。 2、采用大孔树脂法分离纯化芦笋黄酮提取物,研究了上样液浓度、洗脱剂浓度和洗脱剂pH等对黄酮类化合物纯化的影响。结果显示：NKA-Ⅱ能够较好地分离芦笋黄酮提取物,黄酮类化合物在该树脂上的吸附量达0.768mg/mL,解析率为77.59%,其最佳吸附-解吸工艺条件为：上样浓度0.332mg/mL,洗脱剂为70%乙醇,洗脱液pH为9,初步纯化后芦笋黄酮含量为60.7%；采用三氯乙酸法(TCA)去除多糖中的蛋白质、活性炭吸附法脱色,结果表明,TCA添加量为1.0%,活性炭添加量0.1%、脱色时间为5min,初步纯化后芦笋多糖基本不含蛋白质。 3、体外抗氧化活性研究表明,不同浓度的芦笋黄酮对超氧阴离子自由基、羟自由基都有较好的清除作用,且具有一定的剂量效应,2.5mg/mL浓度的芦笋黄酮对超氧阴离子自由基的清除率与0.05mg/mL的抗坏血酸(Vc)相近,而10mg/mL浓度的芦笋黄酮对羟自由基的清除率与2.5mg/mL的Vc接近,虽然芦笋黄酮对超氧阴离子自由基、羟自由基的清除效果低于Vc,但是仍具有较好的清除效果。 4、体外抗氧化活性研究表明,不同浓度的芦笋多糖对超氧阴离子自由基、羟自由基都有一定的清除作用,并且具有一定的剂量效应,10mg/mL浓度的芦笋多糖对超氧阴离子自由基的清除率与0.02mg/mL的Vc相近,10mg/mL浓度的芦笋多糖对羟自由基的清除率与2mg/mL的Vc相近,表明芦笋多糖对超氧阴离子自由基、羟自由基的清除能力低于Vc,但是仍具有一定的清除作用。 5、以芦丁作为芦笋黄酮的主体,采用紫外可见光谱法、圆二色谱法、荧光光谱法初步探讨了芦丁与芦笋多糖之间相互作用的机理,结果表明芦丁与芦笋多糖可能发生了氢键相互作用。