第—部分 临床研究目的：评价气虚痰浊型原发性高血压(Essential Hypertension, EH)患者血清脂联素(Adiponectin, Adipo,APN)水平的变化及其对高血压血管损伤的预测价值；评价益气化痰方药—复方芪麻胶囊对气虚痰浊型EH患者血清APN水平的影响。方法：选取中医证型为气虚痰浊、高血压1级或2级的EH患者84例,同时选取健康体检者30例,通过测定血清APN水平、臂-踝动脉脉搏波传导速度(Brachial—Ankle Artery PWV, baPWV)及肱动脉血流介导的血管舒张功能(Flow-mediated Diastoli c Function, FMD)水平,评价气虚痰浊型EH患者血清APN水平、baPWV及FMD水平的变化；分析气虚痰浊型EH患者血清APN水平与性别、年龄、血压、高血压病程、baPWV及FMD之间的相关性。将84例气虚痰浊型EH患者随机分为两组：常规降压治疗组(简称“常规组”)、常规降压联合复方芪麻胶囊治疗组(简称“联合组”),每组各42例。两组患者均停用原降压药物,按照本研究的给药方案进行治疗。常规组给予替米沙坦片治疗,如2W后血压控制不达标则加用苯磺酸氨氯地平片,视血压水平必要时进一步调整用药；联合组则在常规降压治疗的基础上,给予复方芪麻胶囊治疗,用药时间为8W。用药结束后,评价两组患者血压水平和临床症状的变化,并再次测定血清APN水平,对APN水平的相关影响因素进行分析。结果：(1)与校正性别、年龄的健康对照组相比,气虚痰浊型EH患者APN水平、FMD水平明显下降,baPWV水平明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)气虚痰浊型EH患者血清APN水平与性别、年龄、血压无明显相关性(r分别为-0.135,0.167,-0.112,均P>0.05)；与高血压病程、baPWV显著负相关(r分别为-0.225,-0.242,均P<0.05),与FMD显著正相关(r为0.591,P<0.01)。(3)两组分别有39例和38例患者完成了治疗。治疗后两组收缩压、舒张压水平均显著下降(P<0.01),联合组收缩压水平显著低于常规组(P<0.05),而常规组舒张压水平显著低于联合组(P<0.01)。联合组降压总有效率89.47%,高于常规组的76.92%,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)治疗后两组中医症候积分均较治疗前显著下降(P<0.01),联合组中医症候积分显著低于常规组(P<0.05)。(5)治疗后两组患者血清APN水平均较治疗前有所增加。其中常规组与治疗前相比,差异无统计学意义(P0.05)。(3)常规HE染色示,SHR模型组动脉中层弹性纤维增生,平滑肌细胞排列紊乱,替米沙坦组及复方芪麻胶囊各剂量组较上述有不同程度改善。各组大鼠主动脉内径、内-中膜厚度及PVAT中脂肪细胞形态和体积大小的差异均无统计学意义(P>0.05)。(4) RT-qPCR示,与WKY组相比,SHR模型组主动脉eNOS mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.0])；与SHR模型组比较,替米沙坦组、芪麻中剂量和低剂量组eNOS mRNA表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与WKY组相比,SHR模型组ICAM-1 mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)；替米沙坦组、复方芪麻胶囊各剂量组与SHR模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05). SHR模型组NF- k B p65 mRNA的表达也较WKY组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)；替米沙坦组、复方芪麻胶囊各剂量组与SHR模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。各组MCP-1 mRNA表达水平的差异均无统计学意义(P>0.05)。(5) RT-qPCR示,与WKY组相比,除AMPKa 2, SHR模型组PVAT中APN,主动脉中Adipo R1,AdipoR2和AMPK a 1的mRNA表达均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与SHR模型组相比,替米沙坦组APN, Adipo R1,AdipoR2和AMPK a 1 mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；芪麻低剂组APN, Adipo R1, Adipo R2, AMPK α1和AMPK α 2也显著升高,差异有统计学意义(P<0.50或P<0.01)；而芪麻中剂组Adipo R1,Adipo R2, AMPK α 1和AMPK a 2表达水平也较SHR模型组升高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；芪麻高剂组Adipo R1和AMPK a 2表达也显著增加,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)(6)WB示,与WKY组相比,SHR模型组Adipo R1, Adipo R2, APPL1, AMPK α,p-AMPKα和p-eNOS蛋白水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。与SHR模型组相比,替米沙坦组Adipo R1,APPL1, AMPK α和p-eNOS蛋白表达水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)；芪麻低剂组Adipo R1, Adipo R2, AMPK α,p-AMPK a和p-eNOS表达也明显增加,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；芪麻中剂组Adipo R2, AMPK α,p-AMPK α和p-eNOS表达也较SHR模型组明显上调,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；芪麻高剂组AMPK α,p-AMPK α和p-eNOS水平也明显上调,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(7)免疫组化示,AdipoRl在主动脉全层均有表达,尤其是中膜平滑肌细胞胞浆及内皮细胞胞浆。在WKY组,AdipoRl呈正常状态表达,SHR模型组AdipoRl的蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)；替米沙坦及复方芪麻胶囊各剂量组AdipoRl的表达均较SHR模型组显著增加,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论：(1)SHR高血压状态形成良好,是研究EH的可靠动物模型。(2)复方芪麻胶囊可显著降低SHR的血压水平,增加SHR血清APN及NO水平,减轻SHR主动脉损伤程度。(3)复方芪麻胶囊可显著上调SHR主动脉eNOS表达水平,对其他血管损伤相关因子如ICAM-1,MCP-1, NF-k B p65等影响不显著。(4)复方芪麻胶囊可能通过影响PVAT/APN相关通路,增加主动脉eNOS的表达和活性,促进NO释放,从而减轻高血压血管损伤。
