传统分离培养结合DGGE技术研究新疆传统发酵酸驼乳中乳酸菌的多样性

被引:21
作者
樊哲新
李宝坤
李开雄
朱敏
蒋琰洁
李浩然
机构
[1] 石河子大学食品学院
关键词
酸驼乳; 变性梯度凝胶电泳; 多样性; 传统分离培养; 16S rDNA;
D O I
10.16429/j.1009-7848.2015.04.028
中图分类号
TS252.1 [基础科学];
学科分类号
100403 [营养与食品卫生学];
摘要
目的:分析新疆传统发酵酸驼乳中乳酸菌多样性,为我国传统乳制品微生物资源的利用提供基础数据。方法:采用传统分离培养和基于16S r DNA的PCR-DGGE方法,对12份酸驼乳样品中分离出的87株可培养乳酸菌进行形态、生理生化结合16S r DNA分子法鉴定菌株;对DGGE图谱上的15条16S r DNA目标条带切胶回收测序。结果:传统培养法显示样品中乳酸菌总数在106~108CFU/m L之间,其中植物乳杆菌为优势菌群,次优势菌群为乳酸片球菌;通过DGGE目标条带序列分析与相似性比对,植物乳杆菌、瑞士乳杆菌丰度最高,是优势菌群。此外,鉴定出干酪乳杆菌、屎肠球菌、乳明串珠菌、芽孢杆菌。DGGE图谱显示:样品混合菌群中有5条条带无对应的纯菌株,而纯菌株在混合菌群的图谱上都有相应的条带。结论:传统分离培养与PCR-DGGE在分析优势细菌种群上结果一致,均为植物乳杆菌;用传统分离培养未鉴定到屎肠球菌和芽孢杆菌。DGGE图谱能更全面地反映样品中的弱势菌群,体现样品细菌多样性的真实水平。
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