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- [6] 单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立[J]. 中国预防兽医学报, 2011, 33 (02) : 130 - 132王建广雷质文石琰璟付静芸祝素珍房保海姜英辉刘云国张健杨大伟
- [9] GB 2707-2016. 食品安全国家标准 鲜(冻)畜、禽产品[S]. 2016
- [10] GB 4789.30-2016. 食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验[S]. 2016
数字PCR定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌方法的研究
被引：19
作者：
赵丽青
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方佩佩
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唐静
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马云
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李正义
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王昌军
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苏倩
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贾俊涛
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姜英辉
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机构：
[1] 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心
[2] 中国海洋大学食品科学与工程学院
来源：
关键词：
单核细胞增生李斯特氏菌;
微滴式数字PCR;
定量;
D O I：
暂无
中图分类号：
TS207.4 [食品的微生物检验];
学科分类号：
摘要：
目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌的分析方法。方法选择基因hly A为靶序列,设计PCR扩增引物和Taq Man探针,优化反应条件和反应体系,通过细菌分离和dd PCR方法对靶标基因的检测特异性、灵敏度和重复性进行实验,并对定量结果进行分析。结果 ddPCR反应中的最佳探针浓度为5 pmol/μL,特异性好,检出限为(3.6±0.1)copies/20μL,重复性实验良好,标准偏差为0.067%。ddPCR的拷贝数(copy number)与细菌密度(colony forming units,CFU/mL)形成了较好的线性关系。结论本研究建立dd PCR的拷贝数和菌液密度或菌落数的线性关系,可以为单核细胞增生李斯特氏菌的快速定量检测提供参考。
引用
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页数：6
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