肝豆状核变性分子生物学研究

【目的】探讨中国人肝豆状核变性 (WD)的分子发病机制和基因诊断的方法。【方法】应用基因工程技术对WD进行了 10年的分子生物学研究。【结果】①WD的基因定位研究 :通过RFLP及微卫星多态性分析 ,应用两位点及多位点连锁软件 ,建立了中国人WD基因在D13 q14 .2 -3 区域的精细遗传连锁图谱 ,从而首次对中国人WD基因进行了精确定位 ;②WD基因突变研究 :应用PCR SSCP及DNA测序技术 ,对 39个家系 45名WD患者进行该致病基因的 2 1个外显子突变筛选 ,发现WD基因 5号外显子存在新的T插入突变 ,并证实中国人WD基因的突变热点为 8号外显子 ,突变形式为Arg778Leu ,其频率为 2 2 8% ;③WD的症状前诊断和杂合子检出 :应用DNA重组技术对 79个家系进行基因诊断 ,成功地进行了WD的症状前诊断和杂合子检出 ,并建立了WD的基因筛选的PCR Msp1酶切方法。【结论】中国人WD基因定位与白种人基本相同 ,但基因突变热点不同 ,其发病机制存在差异 ,从而基因诊断的方法也不同。